熒光定量PCR是(realtimefluores-cencequantitativePCR，RTFQPCR)是1996年由美國AppliedBiosystems公司推出的一種新定量試驗技術(shù)，
熒光定量PCR是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對產(chǎn)物進(jìn)行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;剛開始時,探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5'端-3'端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。
實時熒光定量PCR的出現(xiàn)，極大地簡化了定量檢測的過程，而且真正實現(xiàn)了定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實驗的選擇性更強(qiáng)。自動化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測及其他各個領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊，令人欣喜。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識到，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國各個研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見，這就需要我國學(xué)者迎頭趕上，使FQ-PCR技術(shù)更充分地推廣，以推動研究工作的快速發(fā)展。
